De qué depende el tiempo de retención
Cambia con la columna, la temperatura, el flujo y la composición de la fase móvil; en un gradiente, también con la velocidad a la que sube la proporción de disolvente orgánico 1. Por eso un tiempo de retención solo se compara dentro del mismo método.
La secuencia también lo mueve. Dos péptidos con la misma masa que difieren en la configuración de un residuo, L o D, pueden salir a tiempos distintos; compararlos con un estándar de referencia en el mismo método permite detectar esa diferencia, que importa en péptidos con residuos D como la ipamorelina.
El tiempo de retención como apoyo de la identidad
Comparar el tiempo de retención de la muestra con el de un estándar de referencia en el mismo método apoya la identidad del péptido; la masa exacta por LC-MS la confirma.